Le basi delle culture di liofilizzazione (liofilizzazione)
La liofilizzazione, nota anche come liofilizzazione, è un processo utilizzato per preservare il materiale biologico rimuovendo l'acqua dal campione, che comporta prima il congelamento del campione e quindi l'essiccazione, sotto vuoto, a temperature molto basse. I campioni liofilizzati possono essere conservati molto più a lungo dei campioni non trattati.
Perché si usa la liofilizzazione
La liofilizzazione, o liofilizzazione delle colture batteriche , stabilizza le colture per una conservazione a lungo termine, riducendo al minimo il danno che può essere causato dall'essiccazione del campione.
Molti microrganismi sopravvivono bene quando liofilizzati e possono essere facilmente reidratati e cresciuti nei terreni di coltura, dopo lunghi periodi di conservazione.
La liofilizzazione viene utilizzata anche nelle industrie biotecnologiche e biomediche per preservare vaccini, campioni di sangue, proteine purificate e altro materiale biologico.
Questa breve procedura di laboratorio può essere utilizzata con qualsiasi gelofumo disponibile in commercio per preservare la tua collezione di colture.
Il processo di liofilizzazione
Il processo di liofilizzazione è in realtà un'applicazione di un fenomeno fisico chiamato sublimazione: la transizione di una sostanza dallo stato solido allo stato gassoso, senza prima passare attraverso la fase liquida. Durante la liofilizzazione, l'acqua nel campione congelato viene rimossa come vapore acqueo, senza prima scongelare il campione.
Errori comuni
Uno degli errori più comuni quando si tratta di liofilizzazione non è conoscere il punto di fusione del campione, il che rende difficile scegliere il liofilizzatore corretto.
I tuoi campioni potrebbero sciogliersi durante il processo. Un altro errore comune è pensare che il freddo sia migliore quando si liofilizza su un liofilizzatore a scaffale. Durante l'asciugatura primaria, è necessario impostare la temperatura dello scaffale appena al di sotto della temperatura eutettica del campione. Ci dovrebbe essere abbastanza calore per incoraggiare le molecole del campione a muoversi, ma prevenire la fusione.
Un terzo errore sta usando l'attrezzatura sbagliata per i tuoi campioni. Poiché i liofilizzatori sono utilizzati in un gruppo, dovresti sapere quanto segue prima di acquistarne uno:
- Quanta umidità sarà liofilizzata
- Che cos'è il campione (e la temperatura eutettica)
- Come usare correttamente il liofilizzatore
Se l'unità non viene utilizzata correttamente, potrebbe rovinare tutti i campioni. Il che ci porta a un altro errore comune: non mantenere la pompa del vuoto. La pompa deve essere perfettamente funzionante affinché la liofilizzazione funzioni. Far funzionare la pompa con la zavorra per gas aperta 30 minuti prima e dopo il processo di congelamento a secco aumenta la durata della pompa. L'apertura della zavorra per gas elimina i contaminanti dalla pompa per prevenire danni ai componenti interni. È necessario controllare spesso l'olio della pompa per scolorimento e particelle e cambiare l'olio secondo necessità. Regolari cambi d'olio mantengono la pompa tirando al vuoto ottimale durante il processo di congelamento a secco.
Infine, avere gli accessori per la liofilizzazione inadatti per il processo di liofilizzazione può anche essere un grosso errore. Hai bisogno di un campione di tappo sotto il vuoto? Quindi è necessaria una camera di arresto. Sei liofilizzato in fiaschi? Quindi assicurati di avere una camera di essiccazione con le porte.
Evitando gli errori di cui sopra, è possibile fornire una migliore assistenza per il liofilizzatore e la pompa e disporre di campioni migliori quando si esegue la liofilizzazione.
Riferimenti
Labconco News. "I 5 principali errori commessi nel processo di liofilizzazione". http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes