Il tampone citrato di sodio viene utilizzato per l'isolamento dell'RNA poiché minimizza l'idrolisi di base dei filamenti di RNA. Questo lo rende un passo importante nella purificazione dell'mRNA durante la ricerca genomica o per lo studio della trascrizione.
I tamponi a base di citrato possono anche aiutare il rilevamento di antigeni in preparazioni di tessuti fissi perché interrompono i collegamenti incrociati formati tra gli antigeni e il mezzo di fissazione.
Con la guida in basso, crea un tampone citrato di sodio con pH 6. Le istruzioni non sono solo facili, ma anche veloci da eseguire. Dovrebbero essere necessari solo 10 minuti per completare questi passaggi.
Due opzioni per creare il buffer
Ci sono due modi per fare un tampone citrato di sodio. Per prima cosa, determina se hai sia l'acido citrico che la base di coniugato, sodio citrato, con cui lavorare. Se hai solo acido citrico, non è un problema. È ancora possibile creare il buffer.
D'altra parte, se hai sia l'acido che la base, crea una soluzione madre di ciascuno. Mescolare 21 grammi di acido citrico in 1 litro di acqua distillata e 29,4 grammi di citrato di sodio in 1 litro di acqua distillata.
Se si dispone solo di acido citrico, miscelare 2,1 grammi in poco meno di 1 litro di acqua distillata e procedere al passaggio successivo.
Miscelazione di acido citrico e soluzioni di citrato di sodio
Ora che hai creato la soluzione madre (se hai avuto sia un acido che una base) o mischiato l'acido in acqua distillata (se non l'hai fatto), puoi concentrarti sulle tue soluzioni.
Miscelare 82 millilitri della soluzione di acido citrico con 18 millilitri della soluzione di citrato di sodio.
Quindi, rendere il volume totale della miscela fino a poco meno di 1 litro con acqua distillata. Lasciare un volume sufficiente per consentire l'aggiunta di idrossido di sodio (NaOH) nel passaggio successivo.
Regolazione del pH
Mentre si agita delicatamente la soluzione usando un agitatore magnetico, utilizzare 1 M di idrossido di sodio per regolare il pH della miscela su 6.0. Successivamente, preparare il volume finale della soluzione fino a 1 litro con acqua distillata utilizzando un matraccio tarato.
Cosa hai bisogno di fare il Buffer
Non solo non ti ci vorrà molto tempo per preparare il tampone citrato di sodio, non avrai nemmeno bisogno di molti materiali. Con acido citrico, 1 M di idrossido di sodio, acqua distillata e una sonda pH calibrata, sarai a metà strada. L'uso di citrato di sodio è facoltativo.
La realizzazione del tampone richiede anche un cilindro graduato da 1 litro, un matraccio volumetrico da 1 litro e tre flaconi da 1 litro. Infine, avrete bisogno di una barra di agitazione magnetica e di un agitatore magnetico.
Se non possiedi tutti questi materiali, prendi in considerazione l'utilizzo del laboratorio presso la tua scuola o il tuo sito di lavoro, quindi non devi acquistarli da soli. Puoi anche acquistare facilmente questi materiali online o visitare un negozio di specialità nella tua zona.